免费人成年激情视频在线观看,欧美日韩亚洲精品,暴力调教一区二区三区,学长别揉了我快尿了男男

產品列表PRODUCTS LIST

首頁>產品中心>PCR相關試劑>核酸酶系列>Tte AP 熱穩(wěn)定核酸酶

Tte AP 熱穩(wěn)定核酸酶

簡要描述:

Tte AP 熱穩(wěn)定核酸酶公司正在出售的產品:人胚胎干細胞H9無飼養(yǎng)層 分泌細胞凋亡相關蛋白1封閉多肽 隱孢子蟲通用PCR檢測試劑盒 大鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)試劑盒 ELISA 銅藍蛋白(Cp)含量活性比色法檢測試劑盒 高空芽孢桿菌 鈣粘附蛋白9抗體

更新時間:2024-01-14

分享到: 1
在線留言
Tte AP 熱穩(wěn)定核酸酶

商品屬性:

產品名稱

規(guī)格

貨號

Tte AP 熱穩(wěn)定核酸酶

1000U

A-PJ1120

Tte AP 熱穩(wěn)定核酸酶

5KU

A-PJ1120

ThermoStable dsAP Nuclease (耐熱雙鏈特異性AP 核酸內切酶) 來源于嗜熱菌,是一種熱穩(wěn)定的特異性識別雙鏈脫嘌呤/脫嘧啶(AP)位點的核酸內切酶。該酶可
切割 AP 位點 5’端的第一個磷酸二酯鍵,產生 3′羥基和 5′脫氧核糖磷酸末端(deoxyribose phosphate, dRP)。
該酶作用底物為雙鏈 DNA(含 AP 位點),對單鏈DNA(含 AP 位點)、ssDNA、dsDNA 無活性。該酶的最佳活性溫度為 60-70°C,在 85°C 以上溫度逐步失活。

單位定義:
一單位指,在 10μl 反應體系中,60°C 反應 15min,切割1 pmol 含一個 AP 位點的寡核苷酸雙鏈,所需要的酶量。
1×dsAP Buffer:10mM Tris-HCl,pH7.8; 50mM KCl;0.1% Tween20;0.02% BSA, 5mM Mg2+。
酶儲存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.8。
使用方法
含 AP 位點的 DNA 2-20pmol
10xdsAP Buffer 2 μl
ThermoStable dsAP Nuclease 1 μl
ddH2O Up to 20 μl
60°C 反應 15-30minQQ截圖20240110094643.jpg


65.jpg

67.jpg


PCR基本步驟及注意事項?

一、實驗原理

PCR是體外人工選擇性擴增DNA的一種方法,它類似于生物體內DNA的復制。在生物體內DNA復制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、 dNTPs;而體外PCR反應同樣需要類似的成分,有模板、引物、PCR Buffer、Taq酶、dNTPs。其中引物是人工設計的特定序列,實現(xiàn)對特定位置的擴增;PCR Buffer提供一個反應的緩沖環(huán)境;反應過程同生物體內一樣,DNA雙鏈打開,引物結合模板,延伸形成新鏈。而這些過程在生物體內靠DNA解旋酶解鏈,而在體外在通過控制反應溫度實現(xiàn)的。如常用94℃變性模板DNA打開雙鏈,在退火溫度處引物結合到模板上,最后在72℃完成延伸,并反復重復此過程即可實現(xiàn)對特定片段DNA的大量擴增。到第三循環(huán)開始才產生出和靶DNA區(qū)段相同的DNA分子,進一步循環(huán)地產生出靶DNA區(qū)段的指數(shù)加倍。

在擴增后期,由于產物積累,使原來呈指數(shù)擴增的反應變成平坦的曲線,產物不再隨循環(huán)數(shù)而明顯上升,這稱為平臺效應。平臺期(Plateau)會使原先由于錯配而產生的低濃度非特異性產物繼續(xù)大量擴增,達到較高水平。因此,應適當調節(jié)循環(huán)次數(shù),在平臺期前結束反應, 減少非特異性產物。到達平臺期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。

二、主要的成分

1.模板可以是多種形式,主要包括基因組DNA、質粒DNA、攜帶病毒的基因組DNA、PCR產物,cDNA等,但不能為RNA。對于不同類型的模板,其主要不同在于預變性的時間以及模板的量。一般對于大的基因組DNA預變性時間10min足夠,質粒DNA2min、攜帶病毒的基因組DNA預變性2min、PCR產物預變性2min即可。

注意cDNA為單鏈DNA,但仍可做PCR的模板,只不過在第一輪循環(huán)時只有一個引物結合,合成另一條鏈。從第二輪開始,兩個引物均與特異位點結合,從而實現(xiàn)了與常規(guī)PCR的接軌。而同作為單鏈的RNA卻不能進行PCR擴增,原因就在于實現(xiàn)PCR反應的是DNA聚合酶,只能特意識別DNA鏈。

2.對于模版的量來說,一般25ul體系DNA的質量為50—100ng。對于基因組DNA由于其結構比較復雜,提取的濃度也往往比較大,為防止?jié)舛冗^大對PCR造成影響,故需對提取的DNA進行梯度稀釋。否則濃度過高則可能會引起非特異性擴增。對于質粒及PCR產物由于其結構簡單,且提取濃度一般較低,則無需稀釋。

PCR實驗中應該注意的問題有哪些?

沒有ct值

檢測結果遇到沒有Ct值情況,排查是否有以下問題:

1、循環(huán)數(shù)不夠(一般不超過45循環(huán),不僅背景值提高,定量也不準);

2、PCR程序設置錯誤,檢測熒光信號的步驟有誤。一般SG法采用72℃延伸時采集,TaqMan法則一般在退火結束時或延伸時采集信號,另外熒光采集是否選中;

3、引物或探針降解??赏ㄟ^PAGE電泳檢測引物和探針是否降解;

4、模板量可能降解或上樣量不足(不超過500ng,根據(jù)試劑盒說明書即可), 對未知濃度的樣本應從系列稀釋樣本的最高濃度做起;如果發(fā)生模板降解,應考慮樣本準備中雜質的引入及反復凍融的情況,建議將模板樣本小量分裝儲備,避免反復凍融;

5、引物探針是否合適(尤其是引物跨越內含子,以確保擴增基因組DNA;上下游引物Tm值超過4℃以上也會影響擴增)。

ct值過晚

在相對定量中, Ct值一般控制在15—25之間比較好,如果在絕對定量中, 對低拷貝數(shù)的樣品,Ct值會增大, 但是一般不宜超過40循環(huán), 否則定量不準確。

因此,判斷Ct值出現(xiàn)過晚是否屬于非正常情況, 需要根據(jù)具體實驗設計和目的進行。

1、擴增效率低。引物之間或者引物和探針的比例不合適, 需要進行優(yōu)化;引物或探針設計不合理, 需要重新設計;

2、PCR程序不合適, 改用三步法進行反應, 或者優(yōu)化退火/延伸溫度, 可以適當降低退火溫度; 退火/延伸時間短(可以在推薦的時間條件下延長10s);

3、MgCl2濃度不合適,增加鎂離子濃度等。PCR各種反應成分的降解或加樣量的不足;

4、PCR產物太長。PCR產物設計超過500bp;

5、模板中存在抑制物。用高純度模板進行PCR檢測或將模板進行稀釋。

公司正在出售的產品:

非洲豬瘟病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

β-防御2ELISA試劑盒 β-BD-2免費代測試劑

人腺病毒D97型探針法熒光定量PCR試劑盒

絲狀網(wǎng)尾線蟲PCR檢測試劑盒直銷

蛋白酪氨磷樣蛋白AELISA試劑盒 PTPLA免費代測試劑

曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒PCR檢測試劑盒說明書

EB病毒(EBV)核檢測試劑盒

細胞色C-1ELISA試劑盒

馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒

利什曼原蟲PCR檢測試劑盒

低分子量激肽原ELISA試劑盒

馬痘病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

-3ELISA試劑盒

蝦肝腸微胞蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

皮里陶病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉移8ELISA試劑盒

沙門氏菌(SPP)核檢測試劑盒

皮諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒

二氫嘧啶樣3ELISA試劑盒

禽副黏病毒(1型)探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

DELISA試劑盒

萊氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

貓血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

防御β112ELISA試劑盒

藕節(jié)染料法PCR鑒定試劑盒

諾如病毒GⅡPCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

分揀連接蛋白3ELISA試劑盒

馬巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

流行性乙型腦炎病毒 / 新布尼亞病毒核檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR )

人帶3蛋白(Band3)ELISA試劑盒

禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒

人分泌成分(SC)ELISA檢測試劑盒

阿古尼嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

山羊附紅細胞體(山羊嗜血支原體)染料法熒光定量PCR試劑盒

人白介37(IL-37)試劑盒ELISA

羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒

猿分支桿菌PCR檢測試劑盒

γ分泌ELISA試劑盒

Tte AP 熱穩(wěn)定核酸酶牛附紅細胞體探針法熒光定量PCR試劑盒

兔源性成分(Rabbit)核檢測試劑盒

人大腸菌(colicin)ELISA檢測試劑盒

病毒H9N2亞型(AIV-H9N2)雙重核檢測試劑盒(熒光PCR法)

 


天天想你在线播放免费观看| 久久综合狠狠色综合伊人| 国自产拍偷拍精品啪啪一区二区| 人人妻人人妻人人人人妻| 国产精品久久久久久无码不卡 | 爱的色放在线| 国产片+人+综合| 婷婷丁香五月天在线播放 | 白丝jk校花娇喘求饶白浆露出| 免费无码一区二区三区蜜桃大 | 精品国产成人亚洲午夜福利| 老师含紧一点h边做边走视频动漫| 欧美三曰本三级少妇三99| 日本vs中国vs亚洲看无码| 精品人妻无码一区二区三区蜜桃一| 国产手机拍视频推荐2023| 亚洲乱码一区二区三区香蕉| 美女班主任露出奶头喂我乳我| 去部队探亲被全队肉辣文| 巨胸喷奶水视频WWW网站| 又大又粗欧美黑人AAAAA片| 中文字幕有码无码人妻AV蜜桃| 免费完整gay片在线播放| 欧美重囗味sm群虐视频| 妺妺窝人体色www| 同性男在啪的动漫网站| 亚洲国产一区二区a毛片| 欧美av色香蕉一区二区蜜桃小说| 精品无码国产一区二区三区av| 日本疯狂爆乳xxxx| 成年女人色毛片| 男朋友接吻时把手伸到内裤揉| 色婷婷五月| 熟妇就是水多12p| 中文字幕亚洲无线码| 国产熟女高潮视频| 漂亮人妻洗澡被公强 日日躁| 女人脱了内裤高潮喷水30分钟| 欧美xxxx做受性欧美88| 欧美 大码 变态 另类| 国产人妖XXXX做受视频|