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人小氣道平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書

簡要描述:

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更新時(shí)間:2018-11-03

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人小氣道平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

人小氣道平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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人小氣道平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini

葡枝根霉 Rhizopus stolonifer釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)肺

美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳) Pleurotus sapidus中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

 細(xì)胞名稱HT-29, 人結(jié)腸細(xì)胞

大鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

鮮綠青霉 Penicillium viridicatum大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces diastatochromogenes

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeJAR(人胎盤絨毛膜細(xì)胞)

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

 

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